Page 96 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第11期
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??研究
拉霉素的菌?体，通??晶、硅?柱?析、 ODS 柱洗 ??程中 pH 值?持在 8.0-8.5 之?，????，得
?分离、重?晶，抽?后?晶用?水漂洗，烘干?得 到的阿?拉霉素?菌?体，放在真空干燥箱中烘
[6]
阿?拉霉素?品。程豪 ?阿?拉霉素?酵液?? 干，粉碎， ?用。
??理、??和烘干得阿?拉霉素干菌?，?阿? 1.4.2 阿?拉霉素提取工? 取适量阿?拉霉素干
拉霉素干菌?在一定?度下加入有机溶??拌，? 菌?体，用干菌?体重量 7 倍体?的 4- 甲基 -2-
?得浸提液，?其??蒸?得到??浸?液，然后 戊酮溶解，在 80℃下提取 1h，????， 得一浸液；
浸?液?色，低??晶得到阿?拉霉素成品，此工 ?得到一浸?菌渣用干菌?体重量 5 倍体?的 4-
?可有效提高阿?拉霉素有效?分 A、B 的含量。袁 甲基 -2- 戊酮溶解，在 80℃下提取 1h，????，
宗?等[7]以有机溶?浸提阿?拉霉素，浸提液?? 得二浸液；合并一浸液与二浸液，在真空度?
蒸干后得到阿?拉霉素粗品，然后使用一定比例的 0.09MPa，?度? 70℃的水浴?件下????至浸
丙酮 - 水、乙醇 - 水重?晶多次，可得白色的阿? 提液体?的 1/3，??液冷?后加入 2 倍体?正己
拉霉素?品，但此法繁?，收率偏低。?于此， ?者 烷，机械?拌 1h 后????，得到阿?拉霉素?精
?阿?拉霉素提取工??行了研究，可?工?化生 粉，放在真空度? 0.09MPa，?度? 60℃的真空干燥
?阿?拉霉素提供???据，以此填???空白。 箱中干燥 2h，得到白色阿?拉霉素?品。
1 材料与方法 1.4.3 阿?拉霉素效价的?? ??照品溶液的制
1.1 原料 ?：取阿?霉素?照品适量 （?相?于阿?霉素
AVL201606006 批阿?拉霉素?酵液由山?胜 40mg）， 置 100mL 量瓶中， 加丙酮 10mL 使溶解，再
利生物工程有限公司提供。 用乙? -0.132%磷酸?二?溶液 （用磷酸?? pH
1.2 主要?? 值至 7.0）（50?50）稀?至刻度，制成?含 0.4mg/mL
4- 甲基 -2- 戊酮（分析?，上海冀???有限 的溶液。?供?品溶液的制?： 精确?量阿?拉霉
公司）；正己烷（分析?， ??集?化???有限公 素 0.02g，放入 100mL 容量瓶中加入适量丙酮，溶解
司）；乙? （HPLC，J.T.Baker）；甲醇 （HPLC，J.T.Bak- 后用丙酮定容，??、??、?用。?色??件：用十
er）；?氧化?（分析?，??集?化???有限公 八烷基硅烷?合硅??填充?；以乙? -0.2%磷酸
司）；磷酸二??（分析?，??集?化???有限 二??溶液（用磷酸?? pH 值至 3.0）（51?49）?
公司）。 流?相；??波?? 214nm，??量 10μL。
1.3 主要?器 2 ?果与??
液相色?? Agilentl200（Agilent 公司，美?）； 2.1 4- 甲基 -2- 戊酮?阿?拉霉素溶解能力
FW-100 型万能粉碎机 (上海楚定分析?器有限公 在 25℃、40℃、60℃、70℃、80℃、90℃?件下，
司)；JA31002 型?子天平 (上海越平科??器有限 各取 10g 阿?拉霉素溶于 100mL4- 甲基 -2- 戊酮
司)；KDM 型????套 (山?鄄城光明?器有限公 中，??阿?拉霉素溶液效价，???果?表 1。可
司)；Heidolph4000 旋?蒸?? (海道夫，德?)； 以看出，?度越高，4- 甲基 -2- 戊酮溶解的阿?拉
DZF-6050 型真空干燥箱(上海精宏????有限公 霉素量越多。
司)；SHB-Ⅲ型循?水真空泵 (?州?盛???器有
表1 不同?度下阿?拉霉素在4-甲基-2-戊酮中的溶解度
限公司)；xutemp 型低?恒?液浴循??用槽 (杭州
雪中炭恒?技?有限公司)。 ?度( ℃) 效价(U/mL)
25 11608
1.4 ??方法
40 25613
1.4.1 阿?拉霉素干菌?体制? ?酵?束后，取 60 37256
适量?酵液，?拌均?，加?至 90℃保? 15min， 然 70 41689
80 123366
后降?至 50～60℃，用?氧化?溶液??酵液 pH
90 129244
值?至 8.0-8.5 之?。混?后再重新?定，以保??
