Page 59 - 中國動物保健雜誌2018年第20卷第4期

?? 4mg/mL 和 10mg/mL。
1.2 主要??
含?抗（100IU/mL 青霉素和
100μg/mL ?霉素）的 DMEM 培
?液、D-Hanks液、0.25%胰?（含
0.02% EDTA）、胎牛血清均?自
杭州四季青生物工程材料有限公司；
RNA 提取??盒（Trizol）?自北
京天根生化科技有限公司；反??
??盒、?光定量 PCR ??盒?
自 TaKaRa 公司。
1.3 ?胞培?及?理
IPEC-1 ?胞用含有 10% 胎牛
血清的?抗 DMEM 培?基，于 37℃
5%CO 2 ?件下培?，每 24h ?液， ? 1 不同?理? IFN-α mRNA 表?量
48h ?代。采用台盼?法???胞
活性，保持在 95％以上。以培?液
6
?整?胞?度至 1×10 ? /mL，按
每孔 0.95mL 接种至 12 孔?胞培?
板中，37℃ 5%CO 2 ??培?6h，待
?胞?壁，?行??。??分?空
白?照?、?理? 1 和?理? 2，每
? 3 ?重复孔。?照?加入 50μL
PBS；?理?1加入50μL戈戈健溶
液，使其??度? 200μg/mL；?理
? 2 加入 50μL 本草?方溶液，使

其??度?500μg/mL，37℃ 5%CO 2
??培? 6h。
1.4 ?品收集与?定 ? 2 不同?理? IFN-β mRNA 表?量
收集培?后的?胞，提取?
RNA，反??成 cDNA，通? 极?著，P<0.05 表示差异?著， ?表?量??照?极?著上升
?光定量 PCR ?定干扰素 -α P>0.05 表示差异不?著，?果均以 （P<0.01）。???果表明，戈戈
（IFN-α）、干扰素 -β（IFN-β）、 平均值 ± ?准?表示。 健和本草?方均能???上皮?胞
白介素 -6（IL-6）、白介素 -8 ?生干扰素。
（IL-8）、?瘤坏死因子 -α 2 ?果分析 2.2 ?种中?制??促炎?胞因子
（TNF-α）和?化生?因子 -β 2.1 ?种中?制??IFN表?的影? 表?的影?
（TGF-β）的 mRNA 表?量，以 由? 1 可以看出，与?照? 由? 3 可以看出，?理? 1 的
β-actin 基因???，采用 Pfaffl 相比，?理? 1 和?理? 2 的 IL-6 mRNA 相?表?量??照?
建立的方法?算所有基因的相?表 IFN-α mRNA相?表?量均上升， ?著上升（P<0.05），?理? 2 的
[8]
?量 。 其中?理? 2 的差异?到?著水平 IL-6 mRNA相?表?量??照??
1.5 ?据?理 （P<0.05）。由? 2 可以看出，? 著?少（P<0.05）。由? 4 可以看出，
采用 SPSS 17.0 ?件??据 理? 1 的 IFN-β mRNA 相?表? ?理? 1 的 IL-8 mRNA 相?表?
?行?因素方差分析及 Duncan’s 量??照??著上升（P<0.05）， 量??照?极?著上升（P<0.01），
法多重比?。以 P<0.01 表示差异 ?理? 2 的 IFN-β mRNA 相 ?理? 2 的 IL-8 mRNA 相?表?

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