Page 91 - 中國動物保健雜誌第19卷第1期

??研究

按行??准的?量控制：?性?照在 1 090 bp 2 ?果
不出?片段； ?性?照在 1 090 bp 出?片段。 2.1 特异性??
按行??准的?果判定：?品在 1 090 bp 出? 利用 NY/T2417-2013 中?人民共和???行

片段，判??性；?品在 1 090 bp 未出?片段，判? ??准《副?嗜血杆菌 PCR ??方法》（????）、
?性。 常? PCR、?光 PCR 方法?副?嗜血杆菌?准菌株
常? PCR 的?量控制：?性?照在 118 bp 不 （CCVA3729）、金?色葡萄球菌、沙?氏菌、大?杆
出?片段；?性?照在 118 bp 出?片段。 菌?行??，分??行了特异性及重复性??。?果
常? PCR 的?果判定：?品在118 bp 出?片段， ?示，副?嗜血杆菌?准菌株和?性?照??性，其
判??性；?品在 118 bp 未出?片段， 判??性。 它?菌均??性，表明副?嗜血杆菌 PCR ??盒特
?光定量 PCR 的?量控制：?性?控品?明? 异性? 100%（?表 1；? 1～3）。
?增曲?或? Ct 值?示；?性?控品的?增曲?有 2.2 ?敏性??
明?指?生?期，且 Ct 值?32。 ??准菌株依次稀?成 1?106、1?107、1?
?光定量 PCR 的?果判定：若?增曲?有明? 108、1?109、1?1010、1?1011、1?1012、1?1013、
的??增?且 Ct 值＞35，?判定?品??性；若? 1 ?1014、1 ?1015， 分 ? 提 取 DNA。 利 用 NY/T

?不到?品 Ct 值??性。 2417-2013 中?人民共和???行??准 《副?嗜
1.12 ?床?品?? 血杆菌 PCR ??方法》（????）、常? PCR、?光
采自?床疑似病例 20 份血?，分?提取 DNA， PCR 方法?提取的 DNA ?行??，分??行了?
?用常? PCR 和?光 PCR ?种方法?行??，并 敏性及重复性??。?果?示，在?光 PCR ??中
?立?、?性?照。比??种??方法的特异性和敏 ?增曲??可以看出，?准菌株 1×10 -12 稀?可以
感性。 作???的底?，即可以??最低量? 1×10 ，而
-12

? 1 ?? PCR 特异性???果? ? 2 常? PCR ??盒特异 ? 3 ?光 PCR 特异性???果?
性???果?
M：Marker D2000；1：?性?照； 2：?性?照； 3：金? 表 1 ? ? 、 常 ? P C R 、 ? 光 P C R 特 异 性 ? ? ? 果 比 ? 表
? 品 ? ? ? ? ? 果 常 ? PC R? ? ? 果 ? 光 PC R? ? ? 果
色葡萄球菌；4：沙?氏菌；5：大?杆菌；6：副?嗜血
? ? 1 次 2 次 3 次 1次 2 次 3 次 1次 2次 3次
杆菌?准菌株； 副 ? 嗜 血 杆 菌 ? 准 菌 株 + + + + + + + + +
金 ? 色 葡 萄 球 菌 - - - - - - - - -
沙 ? 氏 菌 - - - - - - - - -
大 ? 杆 菌 - - - - - - - - -
? 性 ? 照 + + + + + + + + +
? 性 ? 照 - - - - - - - - -
? 光 ? 性 ? 控 / / / / / / + + +
? 光 ? 性 ? 控 / / / / / / - - -
注 ： 表 中 的 “ + ” 表 示 ? 性 ? 果 ， “ - ” 表 示 ? 性 ? 果

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