Page 105 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第5期

??研究

氮吹?， N-EVAPTM112，Organomation Associ- 酸乙酯，?旋 5 min，4 000 r/min 离心 10 min，取上?
ates, Inc。 乙酸乙酯上清液，重复提取一次，合并?次上清液，
高速冷?离心机，HITACHI CR21GⅢ，日本日 氮气吹干，?留物用 0.25 mL 的初始流?相溶解，?
立公司。 旋 5 min，12 000 r/min 离心 5 min，? 0.22 μm ?
超?水机， Milli-Q，美? Millipore 公司。 膜，上??行?定。

??干燥箱， DGX-9243B-1，上海福???? 2.4 HPLC 方法考察
?有限公司。 ?所建 HPLC 方法的??性、??限和定量限、
超?波?， KQ3200 型，昆山市超??器有限公司。 准确度和精密度、?定性?行??和考察。
振?器，THZ-H-1，Tokyo Rikakikai Co. Ltd. 2.5 ?????
?子秤，TCS-150，永康市江南衡器厂。 ?取适??境的健康杜?大? 16 ?，?机分
1.4 溶液配制 成 2 ?、每? 8 ?，禁食 12 h 后分?按 20 mg/kg ?
氟苯尼考?准??液：精确?取 10 mg 氟苯尼 量（溶解和混?于 140 mL1%羧甲基??素?）?次
考?准品于 10 mL 的容量瓶中，用甲醇定容至刻度， 灌服 20%氟欣泰可溶粉和 2%氟苯尼考?混?，并
配制成 1 mg/mL 的?准??液，保存在 -20℃?用。 于? ?后于 0.083、0.25、0.51、1.5、2、4、6、8、12、18、
氟苯尼考?准工作液：准确量取适量?准?? 24 h ?前腔??采血 5 mL，分离血?、提取、按建立

液用甲醇稀?成适宜?度的氟苯尼考?准工作液。 的 HPLC 方法?行血??度的?定。??期??喂
置 2-8 ℃冰箱中保存?用。 不含任何?物的?料，自由?水。根据??中?得
1.5 ???物和?料 的每??的血??度 - ???据，?制每?的平均
16 ?公母各半的 60 日?体重?（18±1）kg 的 ??曲?。
健康杜?大?（杜洛克×?白×大白），??中?? 2.6 ?据?理和??分析
大?种????后在?中??大????地?? 利用 WinNonlin 非房室模型?理血??度 - ?
适??境 1 周。适??境期?的???境?度? ??据，然后利用 SPSS 方差分析比??????
18~25℃，相??度? 50~65%，自由?水， ??期? 的差异。
?喂未添加任何?物的?料。?料由武?市春?? 3.?果
??物?料机械??部加工生?，配方?玉米粉： 3.1 所建 HPLC 方法色??
53%；豆粕： 24%；三等粉： 8%；?皮： 8%；?粉： 4%； 在本??建立的 HPLC ???件下，氟苯尼考
?：1%；?粉料： 2%。 在 7.7 min 左右出?峰型??性良好的色?峰，溶
2 ??方法 ?、空白血?在氟苯尼考保留??附近未?明?干
2.1 高效液相色?法(HPLC)的???件 扰峰（? 1），表明溶?和空白血?的?源性物?不

色?柱： C18 (Dim：250×4.6 mm，ID：5 μm)；柱 干扰氟苯尼考的?定。由此可?，本方法??性良
?： 30℃；??体?： 20 μL；流?相：水 / 乙? 好、适合用于?血?中氟苯尼考的定量?定。
（68/32，V/V）；流速： 1.0 mL/min；??波?： 224 nm。 3.2 ?准工作曲?及?性范?
2.2 ?准曲?的?制 氟苯尼考?准溶液在 0.03～10 μg/mL 范??，
精密量取氟苯尼考?准工作液适量配制成? 各?度与其??值（峰面?）成?性相?，??度(X)
度? 0.03、0.05、0.1、0.5、0.8、1、5 和 10 μg/mL 的系 与峰面?（Y）?行?性回?，得出氟苯尼考?性方
列?准溶液， 利用建立的 HPLC 方法?行定量?定， 程?： y=21.641x-413.66，相?系? r=0.9994。HPLC
每??度重复?定三次， 利用平均峰面?与相?? ??方法在?血?的最低??限? 0.05 μg/mL，定
度作?性回?，?算回?方程及相?系?。 量限? 0.1 μg/mL。
2.3 ?品前?理 3.3 ?灌服 20%氟欣泰和 2%氟苯尼考?混?后各
取 0.5 mL 血?于 10 mL EP 管中，加 1.5 mL 乙 采血?血??度（?表 1）

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