Page 104 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第4期

??研究

（HRP）??的??抗体 100 μL，用封板膜封板后 旋咪唑的?新城疫?活疫苗??只安全。
置 37 ℃恒?箱?育 60 min；?小心揭掉封板膜，? 分?于免疫后第 7 d、14 d、21 d 翅下??采血，
去液体，吸水?上甩干，每孔加?洗?液，?置 1 分离血清，?定血清抗体效价，?果（表 2）表明，添

min，甩去洗?液，吸水?上甩干，如此重复洗板 5 加不同?度左旋咪唑的白油佐?制?疫苗免疫?
次；?每孔先加入底物 A 50 μL，再加入底物 B 50 的 HI 抗体平均水平均明?高于不含左旋咪唑的白
μL，??震?混?， 37 ℃避光孵育 15 min；?每孔 油佐?制?疫苗免疫?和空白?照?。
加?止液 50 μL，?止反?， 15 min ?在 450 nm 波
表2 不同???在免疫后不同??的抗体水平
?下?量各孔的吸光度；?在 Excel 工作表中，以?
不同??? HI 抗体平均水平（ log ）
2
准品的?度??坐?，?? OD450nm 值??坐?， ?目 A B C D NC
?出?准品?性回?曲?，?算出?准曲?的直? 7 d 0.9 1.1 0.8 0.4 2
回?方程式； ???品的 OD450nm 值代入方程式， 14 d 4.5 4.5 4.4 3.5 2
21 d 7.3 7.4 7.1 4.8 2
?算出?品?度，再乘以?稀?倍? （×n×5）， 即
28 d 8.4 8.3 8.4 7.1 2
??品的???度。 35 d 8.1 7.9 8.1 7.8 2
5 ?果 42 d 7.3 7.2 7.3 6.9 2

5.1 ?新城疫病毒的效价?定 49 d 7 6.9 7 6.1 2
56 d 6.6 6.6 6.6 5.2 3
??定，新城疫病毒 EID50＞108.0/0.1mL，符合
90 d 5.5 5.4 5.5 5.1 3
制苗要求。
5.3 免疫?淋巴?胞增殖??
表1 新城疫病毒的效价?定
淋巴?胞增殖???果?表 3。?果表明，添加
?目 EID /0.1ml HA 不同?度左旋咪唑的白油佐?制?疫苗免疫?的
50
新城疫病毒 108.3 29
淋巴?胞?均高于不含左旋咪唑的白油佐?制?
5.2 免疫效果?? 疫苗免疫?和空白?照?；含 5 mg 或 10 mg 左旋咪
疫苗免疫后，?群外?、 食欲均正常，?不良反 唑的白油佐?制?疫苗免疫?的淋巴?胞??著
?，接种部位????象，吸收效果良好，?明含左 高于其它?。?明左旋咪唑可促??淋巴?胞增

表3 ?免疫后脾淋巴?胞增殖反?

免疫后周?
??
3 6 9 12
NC 0.922±0.080 de 0.918±0.037 de 0.965±0.008 e 0.988±0.033 edc
A 0.975±0.060 d 0.997±0.032 d 1.120±0.031 d 0.972±0.011 dce
B 1.135±0.004 bc 1.131±0.104 c 1.176±0.02 bc 1.077±0.043 abcde
C 1.130±0.065 b 1.236±0.008 b 1.186±0.087 b 1.076±0.094 ab
D 0.902±0.080 de 0.908±0.037 de 0.905±0.008 e 0.908±0.003 edc
注：?据均以 Mean±SD 表示，同一列?据中右上角?相同小?字母（ a ， b ， c ， d ， e ）
者表明??差异?著（P ＜ 0.05 ）。
殖，刺激机体?生??的?胞免疫。 其它免疫?；含 10 mg 左旋咪唑的白油佐?制?疫
5.4 干扰素（IFN-γ）?? 苗免疫?的脾淋巴?胞中 IFN-γ 含量最高。?明
IFN-γ ? 准 曲 ? 的 直 ? 回 ? 方 程 式 ? ： 左旋咪唑可增??新城疫?活疫苗的免疫功能，延
y=0.0156x，R =0.9885。?算出不同 ND 疫苗免疫后 ?疫苗免疫保?期。
2
各?脾淋巴?胞中 IFN-γ 含量，?果?表 4。?果 6 ??
表明，含 5 mg 或 10 mg 左旋咪唑的白油佐?制?疫 添加不同?度左旋咪唑的白油佐?制?疫苗

苗免疫?的脾淋巴?胞中 IFN-γ 含量均明?高于 免疫?的 HI 抗体平均水平、淋巴?胞?、脾淋巴?