Page 73 - 中國動物保健雜誌第19卷第1期

??研究

FADV-I 既可通?种蛋垂直?播病毒，也可以 on 基因 A 片段和 B 片段，并用限制性?切? HaeⅡ
通?污染的?料、?水或排泄物特?是?便而直接 ?其?行了?切，通????的分析可以?禽腺病
或?接接触而水平?播， 但以垂直?播?主。?种 毒 I 群的 12 ?血清型?行?定。

?播方式?合使得病毒可以快速地呈?放射?的 4.1.3 ?光定量聚合??式反?（RTFQ PCR）SYBR
?播，特?是?殖模式比?复?、?殖品种多?、? Green I ?光 PCR 方法是一种在 DNA ?增反?中，
殖管理粗放等情?下，?病?更?重。 以?光化?物??每次聚合??式反?循?后?
3 病毒的分离培? 物?量的方法。与??方法相比，?方法操作??、
3.1 ?胚培?法 耗?短、成本低，具有?高的?用价值。
FADV-I 可以在?胚繁殖。常用的?胚接种途 2008 年，文?玲等根据 Genbank 中禽腺病毒 I
?有 3 种：卵?囊 接种，?毛尿囊膜接种，尿囊腔接 群六?体基因的保守序列??了 1 ?引物， 建立了
种。通??膜尿囊膜途?接种?尿囊腔接种可分离 ??禽腺病毒 I 群 12 ?血清型的 SYBR Green I ?
到病毒，通常引起?胚充血或出血、胚体潮?、?育 光 PCR 方法， 可在 5 h 左右作出定性和定量的??
不良、甚至出?侏儒胚，胚体蜷曲、肝?白和脾? 和?定。
大、?毛尿囊膜增厚等特征。 4.1.4 斑??交??法 （Dot blot）斑??交是指?

3.2 ?胞培?法 DNA 或 RNA ?品直接?在硝酸??素?膜上，然
大多?腺病毒具有?格的宿主范?，因此，往 后与核酸探?分子?交，以?示?品中是否存在特
往用?病毒宿主?物?源的?胞?分离病毒，因? 异的 DNA 或 RNA。
?种?胞??种病毒是最敏感。如果是??中分离 2010 年，朱后?建立斑??交的方法，?方法
FADV-I，可以接种原代?胚肝?胞、??胞、成?? 有利于病料的批量化??，并且方便保?各?病料
?胞培? FADV-I，但成???胞不引起?胞病?， ?品?理后核酸的反??件保持一致，因此?果更
?胚肝?胞和??胞均有病?，如?胞??，折光 加可靠，??重复性能?得到保?，???生?中
性增?，?胞?隙距离增大，呈拉网?，最后?落等 的??和??室??提供了一种可以??的方法。
特征，并且有研究表明?于?病毒?胚肝?胞培? 4.1.5 ?介?等??增??法 （LAMP）?介?等?
法优于???胞培?法的。 ?增是一种新?的核酸?增技?，只需要在水浴?
4 ??技? 恒??件下便可高效?增出核酸，具有特异性高、
4.1 抗原?? ?敏性? 、操作?便等特?。
近年?，?? PCR 技?的?泛?用，??床病 2010 年，唐熠等人根据 I 群禽腺病毒 Hexon 基

原体的??提供了一种快速、敏感、高效的??方 因保守?序列 ，??了一套特异性?介?等??增
法，并与其他技?相?合，被逐步用于 FADV-I 的快 引物，建立了一种适用于 I 群禽腺病毒的 LAMP 快
速??，??病的分子研究奠定的良好的基?。 速??方法。
4.1.1 聚合??式反? （PCR）2013 年，索南卓?在 此外，已有研究用系??化分析法、 DNA 原位
常? PCR 的基?上，根据禽腺病毒 I 群六?体基因 ?交和 hexon 基因 L1 ?的高通量溶解曲?分析法
的保守序列?? ２ ?引物， 建立了 FAVI 的通用套 ??? I 群禽腺病毒。
式 PCR ??方法，提高了常? PCR 的特异性和敏 4.2 抗体??
感性。 ?于 FADV-I 抗体的精确??，能?确切的反
4.1.2 聚 合 ? ? 式 反 ? 和 限 制 性 ? 度 多 ? 性 映家禽的感染情?。 ELISA 技?具有敏感性高、特异
（PCR-RELP） PCR 与限制性?度多?性具有快 性?、?定性好并且能?大批量??等特?，因此

速、??、特异、?敏等优?，可作? I 群禽腺病毒流 成??? FADV-I 抗体的最佳方法，但是由于禽腺
行毒株血清型的快速分型工具。 病毒 I 群具有群抗原性，通?包被抗原的方法?以
2009 年，唐煜等人通??增 I 群禽腺病毒 Hex- ?其?行血清型的?定。

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