Page 68 - 中國動物保健雜誌2018年第20卷第3期

科研
??

doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2018.03.027

一株犬瘟?病毒部分基因片段的特性分析

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邵?庚 ，潘婧 ，?利? ，王?? 2*
（1. 黑?江省森林与?境科?研究院 黑?江??哈? 161005；2. ?北林?大?保???与生?安全研究中心 哈??
150040；3. ?白山科?研究院 吉林延? 133613）

摘要：犬瘟?是一种急性、烈性、高度接触性的病毒性?染病，致死率很高，?重威?多种珍?野生?物的健康，并?毛
皮?物?殖??造成巨大的???失，探?其基因?的???异情?极?重要。本研究使用 4 ?特异性引物，采用 RT-
PCR 方法并?合系??育分析，?犬瘟? L 基因?行特异性分析。?果表明，CDV-L 基因与 41 株犬瘟?病毒病的核?
酸和氨基酸同源性分?在92.33%~98.95%和80.93%~98.28%，同??增得到的毒株序列与登???KM926612（1992
年中?艾鼬）、EU726268（2008 年中?水貂）、HM063009（1989 年哈?克斯坦水貂）以及 HM046486（2007 年
哈?克斯坦海豹）?于同一分支上，??于?基因型毒株的溯源研究具有一定的意?。
???：犬瘟?病毒；RT-PCR ??；L 基因；序列分析

犬 瘟 ?（canine distemper, ?或野生?物感染 CD 的案例，同 本反复?融，剪下部分??分?于
CD）是一种由犬瘟?病毒（canine ?在?去的几十年中，其感染宿主 RNase-free 1.5mL 离 心 管 中，
distemper virus, CDV）引起的多 范?在不??大。我?很多地?大 -20℃保存?用。
宿主的烈性、急性、高度接触性的 型毛皮?物?殖?、?物?甚至保
[1]
病毒性?染病 。CDV 可引?多种 ???均有?物感染 CD 而死亡的 2 ??方法
[2]
?物患病，致死率极高 。CD 分布 ?道。同???大熊?、旗?物种 2.1 貉犬瘟? RT-PCR 方法??
全球，很多?家和地?均有?道家 ?北虎等多种珍?野生?物? CDV 合成 4 ??增 CDV-L 基因
[4]
也高度易感。CD 已?成?威?多 的特异性引物（表 1） ，按照
种野生种群?量和生存健康的极重 Invitrogen 公司的? RNA 提取?
[3]
作者?介：邵?庚，男， 1975 .7—，山?人， 要的?染病 。?一系列事件使得 ?盒的操作?明提取病毒基因??
?士研究生?? ，高?工程?，?事森林?源 ? CD 研究的重要性日益突出。 RNA。反??得到 cDNA。反??
保?工作。 采用 20μL 体系：5μLRNA 模板、
? ? ? 助： ? 家 重 ? 研 ? ? 划 重 ? ? ? 1 ??材料 3μL RNase free H 2 O、1μL dNTP
（2017YFD0501800） ???本?本室保存的患犬瘟 Mixture（10mM each）、1μL 上
* 通?作者，?系方式：yttuhh@yeah.net ?的貉子膀胱上皮??。?避免? 游引物（2pmol/μL）。

表 1 ?增 CDV-L 基因的 4 ?引物序列

目的片段 引物名? 引物序列 (5′→ 3′ ) ?物位置 ?度
L1-F TTGCACCAGTAGAAGAGAAGAC 990bp
L1 10950-11940
L1-R GATCGGATCATTCGTTTGAGGT
L2-F ATCGGGGATCCCGTGACATCTT
L2 11885-12785 900bp
L2-R CATCATCACCATAGGCCCATGA
L3-F ACAGAAGAAAGAACAGACATGAA
L3 12685-13535 850bp
L3-R CGGTGATAATGAATTTCAAAGC
L4-F CAATGTGCTGCAATCAACTG
L4 13480-14505 1025bp
L4-R GAAATCTCTCGTTGTCCAGTTCT

50 中??物保健 | 2018.03