Page 95 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第9期

疾病防治

1.6 ?菌的致病性?物回???
?分离的??球菌用?菌?血?丁肉?增菌
培? 12～24h，?取体重? l8～20g 的健康小鼠 8

只，?机分成 2 ?，每? 4 只， 第 1 ?小鼠腹腔注射
0.2mL/ 只， 第 2 ?腹腔注射?血?丁肉?作??照
?。
1.7 ?菌的 PCR ?定
? GenBank 中下???球菌序列，?照?立?
等文?中 16srRNA 通用引物?行 PCR ?增，?增
?物大小? 1,056bp，PCR ?物? 1%?脂糖凝??
? 1. ??球菌特异性?增?果
泳??。
M:2 000bpDNALadder;1:特异性 PCR ?增?果;2:?性?照
2 ?果与分析
2.1 ?菌的分离培? 泛?注。本??中分离的病原菌?培?特性、染色
取病?部位直接涂片瑞氏染色??可?短? ??、溶血特性及生化特性分析都符合??球菌的

排列的球菌，研磨后接种培?基后革?染色可?? 生物?特性。因此可初步判定?分离菌?致病性?
??排列的革??性球菌，接种兔?血 LB 平板后 ?球菌。?分离菌的培??物接种小鼠后，出??
出?表面光滑??、??整?的?形小菌落，呈?溶 血性及神?症?，?物回??????菌具有??
血，能在 6.5%Nacl 和 PH9.6 的?件下生?。 的致病性，剖?症?与??球菌的症?一致。
2.2 ?菌的生化?定 目前?分离菌常根据典型?床症?、剖?病理
本??分离的??球菌糖?酵特性不活?，只 ?化及?菌分离培?特性、染色及生化特性等?行
能?酵葡萄糖、甘露糖，乳糖、硫化?、氧化???、? 分离?定。但?球菌种?繁多，??球菌与普通?
檬酸?和甲基???均??性， VP ??呈?性。 球菌的不同在于在生化反?上能耐受高?和高?
2.3 ?菌的致病性?物回??? 培?，溶血特性也相同。分子生物??定?球菌的
?分离的??球菌用?血?丁肉?增菌培? 保守 16SrRNA 基因?定方法日益受到青?，?方法
24h，腹腔接种健康小鼠后，第 1 ?小鼠出?神?症 快速?便，准确率高。本??采用???菌分离培
?，均在 48～72h ?死亡，?照?小鼠?明??床 ??定方法和分子生物?方法，?采集自病死羔羊
症?。剖?死亡小鼠，?部有灰色坏死灶，肺?呈大 的分离?菌?行了全面?定，?果?示???球菌

理石?，?系膜淋巴??大。取其?及肺?涂片染 感染。■
色???革?氏?性球菌，瑞氏染色?果也相同。
2.4 ?菌的 PCR ?定
提取分离菌株的 DNA ?模板，以不加模板?
?性?照，通?特异性的 16srRNA 通用引物?行
PCR ?增，?脂糖凝??泳可? 1056bp 左右的特
异??，与?期目的??位置一致，?性?照未?
?? （? 1）。
3 ??
??球菌是人和?物?道?的主要菌群之一，
?菌不?是人?球菌感染和死亡的主要致病菌，而

且近年?畜禽感染??球菌的?道也越?越多，?
菌作?新的人畜共患?染病病原菌，引起了人??

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