Page 42 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第9期

健康?殖

doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2017.09.011

一株?球菌的分离?定及?敏??

??
（山?省博??畜牧??局 山??州 256500）

2016 年 11 月山?省某???生了一种以出血 染色，??。?察?菌形?及溶血情?。
性?血症、心包?液?主要特征的?染病。?病? 1.4 ?菌的生化?定
病突然，病程急，?病?出?体?升高、精神沉郁、 ?所分离?菌?化培?后接种于?丁肉??
呼吸困?、?膜??，口鼻有泡沫?液体流出及病 脂平板上，放置于 37℃的 CO 2 培?箱培? 36h，?
?倒地不起等症?，?病急，?不及用?就出?死 察是否有溶血?象。挑取生?良好的?菌落?移接
亡，??病的??造成?重的???失。采集死亡 种于各?微量生化反?管，根据杭州天和微生物?
病?肝脾及心包?液等病料???室?行?菌分 ?有限公司?明??行， ?察生化反?特性，?定

离培?、革?氏染色、生化特性?定、玻片凝聚? ?果。
?、?敏??及?物回???，并? PCR ??确定 1.5 玻板凝集??
???球菌感染。??告如下： ?分离?定的疑似??球菌的分离菌落接种
1 材料与方法 改良?丁肉?培?基， 37℃的 CO 2 培?箱培? 24h，
1.1 主要??材料 取 1.0mL 培?菌液， 4,000r/min 离心 5min，?上清，
病料??山?省几???采集的疑似??球 用适量 PBS ?浮沉淀，取 20μL ?浮菌液与等体?
菌感染的病?病料，体重? 18～20g 的健康小鼠? 的?菌 PBS、??球菌 2 型?性血清?行玻片凝集
自河南大????物中心。 ??，同?? PBS 空白?照?行?性?照。
1.2 主要?? 1.6 ?敏??
TaqDNA 聚合?、 dNTPs 及 DNA Marker DL2000 ?菌?件下?分离?菌培?物利用 K-B ?片
等?自大??生物工程有限公司；?回收??盒? ?散法?行?敏??，?分离的??球菌接种在改
自上海生工生物工程技?服?有限公司。改良?丁 良?丁肉?培?基中，培?后?菌挑取?菌落后均
肉?培?基、?脂粉等???自北京索??科技有 ?涂布普通?脂平板，用?菌?子?取青霉素、阿

限公司；??球菌的?准?性血清、?敏?片?自 莫西林和?霉素等各种?敏?片?在适?的位置，
北京天?生物公司；?菌生化反?管?自杭州天和 ?培?皿置于 37℃培? 24h ?察?定抑菌圈的大
微生物??有限公司；其他化???如氯仿、异丙 小，判??不同?物敏感性。
醇和乙醇等，均???分析??品。 1.7 ?菌的致病性?物回???
1.3 ?菌的分离培? ??化的分离菌、增菌接种到改良?丁肉?培
?菌取?病?的肝?及心包?液用接种?划 ?基中培? 12～24 h 制成?菌?液，接种 8 只健康
?接种于含 5%?羊血的?丁肉??脂平板上，放 的健康小白鼠，?机分成 2 ?，每? 4 只， 第 1 ?小
置于 37℃的 CO2 培?箱中培? 24～48h，?察生? 鼠腹腔注射 0.5mL/ 只， 第 2 ?腹腔注射?丁肉?培
情?及菌落特征。挑取疑似菌落涂片并?行革?氏 ?基作??照?。?察??小鼠的?病情?，剖?
死亡小鼠?察病理?化，取病料??。

作者?介： ??(1982-),女,山?博?人,?族,本科,研究方向: 1.8 ?菌的 PCR ?定
??. ? GenBank 中??球菌序列，?照文?中