Page 72 - 中國動物保健雜誌2018年第20卷第2期
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科研
??
?的添加量? 1ml,以 200r/min 速
度?拌?,其金?粒大小均?,外
型??形,其直?大小? 22nm 左
右,符合?体金制?的要求。(如
? 1)
? 2 稀?不同?度的抗体蛋白
表 1 不同?度抗体?色?果
抗体?
60 μg/mL 45 μg/mL 30 μg/mL 15 μg/mL 0 μg/mL
??度
? 1 ?粒大小
第一次 ?色 ?色 ?色 紫?色 紫色
2.2 抗体最佳???度确定 第二次 ?色 ?色 ?色 紫?色 紫色
取 5 支 1.5mL 离心管,每支 第三次 ?色 ?色 ?色 紫?色 紫色
管中加入 1mL ?体金溶液,再在一
支?管中加入 100μL 0.01 mol/L
PBS 溶液做?空白?照,在其它几
支离心管中各加入 100μL 用 0.01 表明加入的抗体蛋白量不足;?加 2.4 金??合?的??
mol/L PBS 稀?不同?度(分?? 入 15 mg/L 抗体蛋白?,?管中的 金??合?种?一般有玻璃?
15、30、45、60μg/mL)抗体蛋 ?色?紫?色,表明加入的抗体蛋 ?膜、聚酯膜、???等,合格的
白后??,然后再每隔 5 min ? 1 白量?是不足;?加入抗体蛋白量 金??合?不但要求材??定,易
min,半小?后?察?色?好?定? ? 30 mg/L 的?候,?管中的?色 于操作,而且最重要一?是其?金
于不?的?色的那支离心管,其? ?好?于?定的?色,表明此刻加 ?溶液有?低的非特异性吸附。本
?的蛋白添加量?最少蛋白?定量, 入的抗体蛋白量正好可以与?体金 ??? SB06、GL048、Whatman
然后再在???量的基?上加 20% ?合,一般在最低添加量的基?上 33g la ss 、 A hlstro m 6 6 1 3 、
确定?最适蛋白??量。 如? 2 和 再加上 20% 作???工作用量,即 Ahlstrom8964 五种膜?行?比??
表 1 所示,?加入抗体蛋白的量? 36 mg/L?合适的抗体蛋白添加量。 ?行??,??多次??,最???
0 mg/L ?,?管中的?色?紫色, 2.3 抗体??复溶液的确定 金?抗体?放完全,且背景?色好的
用低?高速离心的方法?化金 Ahlstrom8964 作?金??合?。
?抗体,除去?体金??抗体溶液中 2.5 硝酸??素膜上???和?控
作者?介: 的聚集物以及其它??,步?如下: ?的确定
唐世云,(1974-),?士,主要?事 食 ? 以 12000 r/min,4℃ 离心 用 VP60 蛋白??的?体金作
品加工与安全工作 30 min 离心后去掉上清; ?探?,用?化的兔瘟病毒 VP60 蛋
王玉茂,(1964-),研究?, 主要? ?用 0.01 M pH7.4 的 PBS 配 白按 1:2,1:4,1:8,1:16 ?
事???床及科研工作 制复溶液,?沉淀用各复溶液溶解至 度作????和?控???,在 NC
* 通?作者 原体?,重复一次,最后离心沉淀用 膜上划?,加?性血清??,血清中
基金?目:山?省?代????技?体系特种 复溶液重?至原体?的 1/10 ,4℃ 的抗兔瘟病毒抗体与 SPA ??的?
???物?新???目(SDAIT-21-15) 保存?用。 体金形成复合物,由于?析作用复合
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