Page 72 - 中國動物保健雜誌2018年第20卷第2期
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科研
                     ??







              ?的添加量? 1ml,以 200r/min 速
              度?拌?,其金?粒大小均?,外
              型??形,其直?大小? 22nm 左
              右,符合?体金制?的要求。(如
              ? 1)








                                                ? 2 稀?不同?度的抗体蛋白



                                                表 1 不同?度抗体?色?果


                                                抗体?
                                                           60 μg/mL           45 μg/mL   30 μg/mL         15 μg/mL                0 μg/mL
                                                ??度
               ? 1 ?粒大小
                                                第一次        ?色               ?色       ?色            紫?色      紫色
              2.2 抗体最佳???度确定                    第二次        ?色               ?色       ?色            紫?色      紫色
                  取 5 支 1.5mL 离心管,每支            第三次        ?色               ?色       ?色            紫?色      紫色
              管中加入 1mL ?体金溶液,再在一
              支?管中加入 100μL 0.01 mol/L
              PBS 溶液做?空白?照,在其它几
              支离心管中各加入 100μL 用 0.01             表明加入的抗体蛋白量不足;?加                   2.4 金??合?的??
              mol/L PBS 稀?不同?度(分??              入 15 mg/L 抗体蛋白?,?管中的                  金??合?种?一般有玻璃?
              15、30、45、60μg/mL)抗体蛋              ?色?紫?色,表明加入的抗体蛋                   ?膜、聚酯膜、???等,合格的
              白后??,然后再每隔 5 min ? 1              白量?是不足;?加入抗体蛋白量                   金??合?不但要求材??定,易
              min,半小?后?察?色?好?定?                 ? 30 mg/L 的?候,?管中的?色              于操作,而且最重要一?是其?金
              于不?的?色的那支离心管,其?                   ?好?于?定的?色,表明此刻加                   ?溶液有?低的非特异性吸附。本
              ?的蛋白添加量?最少蛋白?定量,                  入的抗体蛋白量正好可以与?体金                   ??? SB06、GL048、Whatman
              然后再在???量的基?上加 20%                 ?合,一般在最低添加量的基?上                   33g la ss 、 A hlstro m 6 6 1 3 、
              确定?最适蛋白??量。 如? 2 和                再加上 20% 作???工作用量,即                Ahlstrom8964 五种膜?行?比??
              表 1 所示,?加入抗体蛋白的量?                 36 mg/L?合适的抗体蛋白添加量。               ?行??,??多次??,最???
              0 mg/L ?,?管中的?色?紫色,               2.3 抗体??复溶液的确定                    金?抗体?放完全,且背景?色好的
                                                    用低?高速离心的方法?化金                 Ahlstrom8964 作?金??合?。
                                                ?抗体,除去?体金??抗体溶液中                  2.5 硝酸??素膜上???和?控
              作者?介:                             的聚集物以及其它??,步?如下:                  ?的确定
                      唐世云,(1974-),?士,主要?事 食         ? 以 12000 r/min,4℃ 离心             用 VP60 蛋白??的?体金作
              品加工与安全工作                          30 min 离心后去掉上清;                   ?探?,用?化的兔瘟病毒 VP60 蛋
                     王玉茂,(1964-),研究?, 主要?           ?用 0.01 M pH7.4 的 PBS 配       白按 1:2,1:4,1:8,1:16 ?
              事???床及科研工作                        制复溶液,?沉淀用各复溶液溶解至                  度作????和?控???,在 NC
              * 通?作者                            原体?,重复一次,最后离心沉淀用                  膜上划?,加?性血清??,血清中
              基金?目:山?省?代????技?体系特种              复溶液重?至原体?的 1/10 ,4℃               的抗兔瘟病毒抗体与 SPA ??的?
              ???物?新???目(SDAIT-21-15)           保存?用。                             体金形成复合物,由于?析作用复合


        54  中??物保健  |  2018.02
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