Page 65 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第11期

疾病防治

根据 Genebank 中 PEDV、TGEV 的 N 基因序 RT-PCR ?物??脂糖凝??泳???示，
列，分???特异性??引物 （PEDV 上游引物 F1： PEDV ?增?物在 506bp 的位置?出?特异性?增
5'-AGGATCGTGGCCGCAAAC-3'， 下 游 引 物 R1： ??，与?期大小相一致；而 TGEV ?增?物?任

5'-TGAATTACCGCGGGACTG-3'；TGEV 上 游 引 物 何?增??。即 RT-PCR ???果? PRDV ?性，
F2：5'-TGAAGGGCCAACGTAAAG-3'， 下 游 引 物 TGEV ?性。
R2：5'-GGGCGAGCATAGGCATTA-3'），引物由生工 2.5 ?序?定?果
生物工程（上海）股份有限公司合成。利用病毒基因 ?序?果??与 GenBank 中登?的序列比?
? RNA 提取??盒提取?理后病料?品的病毒基 分析?示? PEDV 的特异性序列，?核?酸序列水
因? RNA，利用一步法 RT-PCR ????盒?行 平???明????生了 PEDV 感染。
RT-PCR ? 增 。 RT-PCR 反 ? 体 系 ? ： 2 ×Mix 3 ??
Buffer12.5μL，? 0.5μL，上、下游引物各 0.5μL， PEDV 与 TGEV 同?于冠?病毒，都只有一种
RNA2.0μL，?水至 25μL。RT-PCR 反?程序?： 血清型，?者之??有交叉保?，所以?模??要
50℃ 60min，94℃ 5min，94℃ 45s，54℃ 45s，72℃ 同?做好?种疾病的疫苗免疫接种。PEDV 与

1min，30 ?循?； 72℃ 10min。RT-PCR ?增?物? TGEV 感染在?床症?上?明?差?，病?和?毒
?脂糖凝??泳???察?果， PEDV 的?期?增 ?都是主要的?染源。TGEV 感染?生有明?的季
片段大小? 506bp，TGEV 的?期?增片段大小? ?性，一般多?于冬季和春季，仔?感染后表??
760bp。 ?重腹?，?水，2 月?以?仔?的?病率和死亡率
1.4 ?序?定 都很高。PEDV 感染后病死率比 TGEV 感染病死率
? RT-PCR ?增?物用?回收??盒回收? 稍低， PEDV 感染可引起急性腹?，?吐，持??天，
化，送生工生物工程（上海）股份有限公司?序，? 新生仔?的病死率?到 50%以上，病?主要集中在
?序?果与 GenBank 中登?的序列?行比?分析。 小?部位，呈?急性炎症?化。
2 ?果和分析 ?模化???生病毒性腹?很普遍，在?床上
2.1 ?床症? 很??? PEDV 与 TGEV 的????。?了确?可
???病仔? 1 月?左右，?床表??精神沉 以通???室??方法，PEDV 与 TGEV 的???
郁，消瘦，很少?食或拒??食，?食后?吐，?吐 ?方法有很多种，RT-PCR 方法操作??、??快
物中含未消化的凝乳?， 酸臭，急性腹?，排??色 速，可以准确、快速的确?病原，是最常用的???
水??便，?便中有气泡和未消化的凝乳?，机体 ?方法。除了 RT-PCR 方法以外，?可以用?体金

?重?水，消瘦明?，体?正常，一般?病后 3～5d ???、 cDNA 芯片、?光定量 RT-PCR、?介?等
死亡，同圈仔??病率? 80%左右，死亡率在 20% ??增和 ELISA 方法等，各种??方法均具有各自
左右。?病后??曾用抗生素?行治?，??著效 的优缺?，可根据???件???用。?群一旦?
果，???未?行? PEDV、TGEV 相?疫苗的免 生 PEDV 感染后要?病?立即隔离??，密切?
疫。 察，可以?用康复?血清或 PEDV 高免卵?抗体?
2.2 解剖病理?化 行治?。病?康复后也要隔离?察一段??，因?
?病死仔?解剖可??道病?明?，?系膜淋 在病?康复后也有可能向外排毒。??防本病，?
巴?水?，???，?壁?薄，小??有大量?色黏 ?制定合理的疫苗免疫接种?划，目前 PEDV 商品
稠液体，含有未消化的凝乳?，胃黏膜出血。 化的疫苗包括弱毒疫苗和?活疫苗，由于 PEDV 的
2.3 ?床???果 免疫以黏膜免疫?主，高水平的母源抗体可以保?
根据?床症?和解剖病理?化初步怀疑致病 新生仔?免受感染。如何?得高水平的母源抗体是

原? PEDV、TGEV、或 PEDV 和 TGEV 混合感染。 新生仔?免受感染的??，通常?? PEDV 与
2.4 病料?品 RT-PCR ???果 TGEV 二?疫苗在母??前 2 周?行?行免疫，新

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