Page 82 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第9期
P. 82
疾病防治
能?酵葡萄糖、蔗糖、乳糖、?芽糖、半乳糖、木糖和 5.2 病毒分离
阿拉伯糖等?酸?气,不能?酵甘露糖,不?生 ??病?的心?、肝?和??等??用?菌生
H2S,??????性, V-P 和枸?酸?利用??? 理?水按照 1?10 比例??研磨,反复?融 3 次
?性,符合大?杆菌的生化特性。 后,12,000rpm 离心 10 分?,上清液? 0.22μm ?
4.4 ?敏?? ?除菌后,卵?囊途?接种 10 枚 7 日? SPF ?胚
利用 K-B 涂布法?定分离菌株?磷霉素、氟苯 (?自?南斯帕法斯家禽有限公司), 0.2mL/ 胚,
尼考、阿莫西林、丁胺卡那、新霉素、?丙沙星、?力 37℃孵育,接种后 72~96h ?胚集中死亡,剖??
霉素、多粘菌素和?孢曲松共 9 种?敏?片 (均? 胚可?明?的心包?液,肝?有出血?和坏死?及
自北京天??物生物技???公司) 的?物敏感 ??充血?大等典型症?,收取 24~144h 致死?
性,?示分离菌株?磷霉素、丁胺卡?敏感,?其它 胚的卵?液, -20℃保存。
7 种?物低敏感或耐?。 5.3 分离毒株的 PCR ??
5 病毒??? 按照 5.1 的方法?分离毒株?行 PCR ??,?
5.1 ?床病料?品 PCR ?? 果?示只有 Fav-I 引物?增??性,其余引物?增
利用病毒基因? DNA/RNA 提取??盒(美? 均??性。
AXYGEN 公司?品)提取?床病料?品的病毒基因 6 ?合???果
? DNA/RNA。利用山?省?州畜牧??研究院? ?合?病情?、?床特征和病理?化等?床??
?合成的 Fav-I、?新城疫病毒 (NDV)、??染性支 以及?菌???、病毒???等??室???果,?
气管炎病毒 (IBV)、H9 ?型禽流感病毒 (AIV-H9)、 合确?? I ?群禽腺病毒和大?杆菌混合感染。
??染性喉气管炎病毒 (ILTV)、禽网??皮??增 7 小?与体?
生病毒 (REV)和禽呼?孤病毒 (ARV)特异性??引 腺病毒病是一?老病, I ?群 FAV 引起包涵体
物 (??表 1),??床病料?品的病毒基因? 肝炎、心包?液 - 肝炎?合征,宿主非常?泛,主要
DNA/RNA ?行 PCR/RT-PCR ??, PCR ?增?物 ?生于 3~5 周??交?、麻?, 也可?于肉?、种
? 1%?脂糖凝??泳???示,只有 Fav-I ??引 ?和蛋?。?病?群多于 3 周??始出?死亡, 4~
物的 PCR ?增?物在位于? 430bp ?均具有特异 5 周??到死亡高峰,死亡率? 20%~75%,最高可
性??,与?期大小相符。 ? 80% 。商品肉?也能感染?病,?病日?多集中
[6]
在 15~25 日?。除?、?外,?子、???也有?
表1 引物信息表 病。I ?群 FAV ?在越?越受到重?,逐??入免
?增?度 疫程序,但目前我?尚?正?的商品化 I ?群 FAV
病毒 序列(5’-3’ )
( bp )
F:CATTGCGGCCTCTTCGACC 疫苗。Ⅱ?群 FAV 主要引起火?出血性?炎,?脾
FAV-I 430
R:TACGTTCGGGCT GGTTGAC ??大,?少?。Ⅲ?群 FAV 主要引起蛋禽的?蛋
F : AGCTGCAGGAATTGTGGTTAC 下降,已??入免疫程序,近年?流行率?低。
NDV 221
R : CCCCTCCAGATGTAGTCACAG
I ?群 FAV 的感染往往??性感染,大部分??
F : GGTATTATTCATGGTGGTCGT
IBV 489 症?感染,病毒?期存在于正常禽?的上呼吸道、消化
R : TGCTAACAAGCCTCTAGGTGA
F : AGCAAAAGCAGGGGAACTCA 道和肝?等部位,呈?毒??,正常情?下不?病,?
AIV-H9 808
R : CCATACCATGGGGCAATTAG 激因素或与其它致病原的混合感染均可?其?病,表
F:AACTTGAATGTCG GGAGGT
ILTV 427 ?出典型的?床症?。?者 2015 年??? 2 例 4 日
R:CGTTGGAGGTAGGTGGTAG
?、5 日??病,??病例??均?自同一孵化?的蛋
F:CGCTGGCTCGCTAACTGCCAT
REV 467
R:ACGGATTCAG TCCGGATCCCT ???群,及?注射抗体后,死亡率分?? 19.17%
F:GGTAACGTCCATTGTCAGG (1150/6000) 和 18.67%(560/3000)。 2016 年 ? ?
ARV 247
R :AAACGTCGTATGGCGGA
20,000 只肉??,5 日??始?病,至 48 日?出售共