Page 82 - 中國動物保健雜誌2017年第19卷第9期
P. 82

疾病防治


              能?酵葡萄糖、蔗糖、乳糖、?芽糖、半乳糖、木糖和                          5.2 病毒分离
              阿拉伯糖等?酸?气,不能?酵甘露糖,不?生                                 ??病?的心?、肝?和??等??用?菌生
              H2S,??????性, V-P 和枸?酸?利用???                       理?水按照 1?10 比例??研磨,反复?融 3 次

              ?性,符合大?杆菌的生化特性。                                   后,12,000rpm 离心 10 分?,上清液? 0.22μm ?
              4.4  ?敏??                                         ?除菌后,卵?囊途?接种 10 枚 7 日? SPF ?胚
                  利用 K-B 涂布法?定分离菌株?磷霉素、氟苯                      (?自?南斯帕法斯家禽有限公司), 0.2mL/ 胚,
              尼考、阿莫西林、丁胺卡那、新霉素、?丙沙星、?力                          37℃孵育,接种后 72~96h ?胚集中死亡,剖??
              霉素、多粘菌素和?孢曲松共 9 种?敏?片 (均?                         胚可?明?的心包?液,肝?有出血?和坏死?及
              自北京天??物生物技???公司) 的?物敏感                            ??充血?大等典型症?,收取 24~144h 致死?
              性,?示分离菌株?磷霉素、丁胺卡?敏感,?其它                           胚的卵?液, -20℃保存。
              7 种?物低敏感或耐?。                                      5.3  分离毒株的 PCR ??
              5 病毒???                                               按照 5.1 的方法?分离毒株?行 PCR ??,?
              5.1  ?床病料?品 PCR ??                                果?示只有 Fav-I 引物?增??性,其余引物?增

                  利用病毒基因? DNA/RNA 提取??盒(美?                      均??性。
              AXYGEN 公司?品)提取?床病料?品的病毒基因                         6 ?合???果
              ? DNA/RNA。利用山?省?州畜牧??研究院?                             ?合?病情?、?床特征和病理?化等?床??
              ?合成的 Fav-I、?新城疫病毒 (NDV)、??染性支                     以及?菌???、病毒???等??室???果,?
              气管炎病毒 (IBV)、H9 ?型禽流感病毒 (AIV-H9)、                  合确?? I ?群禽腺病毒和大?杆菌混合感染。
              ??染性喉气管炎病毒 (ILTV)、禽网??皮??增                        7 小?与体?
              生病毒 (REV)和禽呼?孤病毒 (ARV)特异性??引                          腺病毒病是一?老病, I ?群 FAV 引起包涵体
              物 (??表 1),??床病料?品的病毒基因?                           肝炎、心包?液 - 肝炎?合征,宿主非常?泛,主要
              DNA/RNA ?行 PCR/RT-PCR ??, PCR ?增?物                ?生于 3~5 周??交?、麻?, 也可?于肉?、种
              ? 1%?脂糖凝??泳???示,只有 Fav-I ??引                      ?和蛋?。?病?群多于 3 周??始出?死亡, 4~
              物的 PCR ?增?物在位于? 430bp ?均具有特异                      5 周??到死亡高峰,死亡率? 20%~75%,最高可
              性??,与?期大小相符。                                      ? 80% 。商品肉?也能感染?病,?病日?多集中
                                                                       [6]
                                                                在 15~25 日?。除?、?外,?子、???也有?

                                表1 引物信息表                        病。I ?群 FAV ?在越?越受到重?,逐??入免
                                                    ?增?度        疫程序,但目前我?尚?正?的商品化 I ?群 FAV
               病毒               序列(5’-3’ )
                                                     ( bp )
                         F:CATTGCGGCCTCTTCGACC                  疫苗。Ⅱ?群 FAV 主要引起火?出血性?炎,?脾
               FAV-I                                  430
                        R:TACGTTCGGGCT GGTTGAC                  ??大,?少?。Ⅲ?群 FAV 主要引起蛋禽的?蛋
                       F : AGCTGCAGGAATTGTGGTTAC                下降,已??入免疫程序,近年?流行率?低。
               NDV                                    221
                        R : CCCCTCCAGATGTAGTCACAG
                                                                    I ?群 FAV 的感染往往??性感染,大部分??
                       F : GGTATTATTCATGGTGGTCGT
               IBV                                    489       症?感染,病毒?期存在于正常禽?的上呼吸道、消化
                       R : TGCTAACAAGCCTCTAGGTGA
                        F : AGCAAAAGCAGGGGAACTCA                道和肝?等部位,呈?毒??,正常情?下不?病,?
               AIV-H9                                 808
                        R : CCATACCATGGGGCAATTAG                激因素或与其它致病原的混合感染均可?其?病,表
                        F:AACTTGAATGTCG GGAGGT
               ILTV                                   427       ?出典型的?床症?。?者 2015 年??? 2 例 4 日
                         R:CGTTGGAGGTAGGTGGTAG
                                                                ?、5 日??病,??病例??均?自同一孵化?的蛋
                        F:CGCTGGCTCGCTAACTGCCAT
               REV                                    467
                       R:ACGGATTCAG TCCGGATCCCT                 ???群,及?注射抗体后,死亡率分?? 19.17%
                         F:GGTAACGTCCATTGTCAGG                 (1150/6000) 和 18.67%(560/3000)。 2016 年 ? ?
               ARV                                    247
                          R :AAACGTCGTATGGCGGA
                                                                20,000 只肉??,5 日??始?病,至 48 日?出售共
   77   78   79   80   81   82   83   84   85   86   87